目的 观察菌尿对尿液分析仪(美国尿沉渣分析仪DiaSys R/S500和FA100尿液分析仪)测定红细胞产生的影响。方法 用DiaSys R/S500和镜检法、FA100和单克隆法分别测定菌尿、非菌尿尿液的红细胞(或潜血)取健康正常人尿液加入一定浓度的细菌(菌尿组),再用分析仪测定其红细胞。结果 (1)菌尿组DiaSys R/S500细胞数假阳性率、尿潜血假阳性率(21.5%)明显高于非菌尿组(6.5%),两者经t检验,P<0.01。(2)FA100测定菌尿组尿潜血假阳性率(19.5%)明显高于非菌尿组(4.5%),两者经t检验,P<0.01。(3)人工加入细菌后,尿液两种分析仪尿红细胞测定结果也明显高于非菌尿组。结论 菌尿影响尿沉渣分析仪和干化学尿液分析仪尿红细胞测定结果,这对尿液检验质量控制有一定的帮助作用。

  尿红细胞检测是诊断泌尿系疾病,特别是肾病的重要实验指标之一。显微镜检查仍是目前检测尿液有形成份的主要手段。随着自动化尿液分析仪的问世,给尿液分析过筛检测带来了一些方便,但该型仪器是否受菌尿的影响,造成尿红细胞实验结果差异,迄今未引起注意,本文对此进行了研究,现报告如下。

  1 材料与方法

  1.1 标本来源 (1)菌尿:用一次性洁净塑料尿杯随机收集门诊怀疑有泌尿系感染患者晨尿200例。(2)非菌尿:用一次性洁净塑料尿杯随机收集院内确诊非泌尿系感染患者晨尿200例。(3)人工菌尿:用一次性洁净塑料尿杯随机收集我科正常性尿液50例,然后将这些尿液标本随机加入培养细菌(属泌尿系感染的细菌,专用培养基培养 [2] )使用细菌数为105~107/ml之间,同时用不加细菌的尿液作为对照组。

  1.2 实验器材 尿沉渣分析仪DiaSys R/S500(美国)FA100型尿液分析仪(山西亚森)及配套试带(烟台宝威批号:2004021201)单克隆潜血试纸(万华普曼公司)。

  1.3 实验方法

  1.3.1 尿红细胞的测定 用尿沉渣分析仪、尿液分析仪(干化学法)和直接镜检法对红细胞进行测定。其方法为:尿液混匀后,用一次性专用试管分别取非菌尿组和菌尿组尿液10ml,直接在DiaSys R/S500和FA100上,严格按说明书操作,记录实验结果(每天实验前用质控对仪器进行监控)在高倍镜下计数10个大方格的红细胞数,以每微升红细胞平均数报告,所有试验均在2h内完成。

  1.3.2 尿潜血的测定 尿液混匀后,直接将潜血试纸放入尿液中,30s后取出,在5min内观察结果。结果判断:在测试线及反应线上同时出现两条紫红色色带者为阳性(潜血试纸对血红蛋白的敏感性是0.2ng/ml),只在测试带出现一条紫红色色带者为阴性。

  2 结果

  2.1 DiaSys R/S500和镜检法测定菌尿组和非菌尿组尿液 尿红细胞结果分别为(204±123.0)×10 6 /L和(108±98.1)×10 6 /L。如果以镜检法检查尿红细胞为标准,则菌尿组UF-100测定红细胞数假阳性率为21.5%而非菌尿组为6.5%。两者经t检验,P<0.01,差异有非常显著性。

  2.2 FA100型尿液分析仪和单克隆潜血试纸法测定菌尿组和非菌尿组尿液 尿红细胞(或潜血)结果如果以单克隆潜血试纸法检查尿潜血为标准,则菌尿组尿液分析仪测定尿潜血假阳性率为19.5%而非菌尿组的假阳性率为4.5%。两者经t检验,P<0.01,差异有非常显著性。

  2.3 50例人工菌尿加入前后两种方法的测定结果 DiaSys R/S500测定红细胞结果分别为(10±10.0)×10 6 /L和(45±28.0)×10 6 /L。经统计学处理,P<0.01,差异有非常显著性。FA100型尿液分析仪在加入前后,尿潜血见表1。经非参数统计学处理,P<0.01,差异有非常显著性。

  表1 50例人工菌尿FA100红细胞测定结果略

  3 讨论

  显微镜血尿是一系列泌尿系病理变化的初始信号,因此没有症状的血尿检测对疾病的早期诊断显得十分重要。同样,血尿检测的准确程度也同样重要,因为基于阳性发现患者要经历对身体有侵害和昂贵的泌尿学检查。目前,显微镜和干化学检查法是诊断显微镜血尿的两种常用方法。干化学法具有快速、操作简单,使得更具有吸引力。但是,干化学法在测定血尿中还存在一定的局限性,如尿中维生素C的存在会导致干化学法红细胞检查的阴性在泌尿系感染中,多数革兰阴性菌和某些革兰阳性菌可能释放过氧化物酶,这些物质和酶在干化学法测定尿红细胞时,都能使试带中的过氧化氢茴香素或过氧化氢稀枯分解出氧原子, 后者使色源呈色而出现假阳性。本文结果显示:菌尿组FA100型尿液分析仪测定红细胞为阳性,而潜血板法为阴性,占总检测数的百分比为19.5%而非菌尿组的百分比为4.5%同时又用培养细菌作成菌尿,再用尿液分析仪进行试验测定其红细胞,也得出同样的结果。因此可以肯定菌尿对尿红细胞测定有一定的影响。为了证实这一影响因素,我们进行了下列两项实验:(1)用常见的泌尿系感染的细菌,配制成不同浓度的细菌,放置15min后,用FA100型尿液分析仪测定其红细胞,结果显示由于细菌种类不同,对尿红细胞测定结果影响程度也不相同(见表2),以假单胞菌属最大,细菌浓度为10 4 /ml即影响红细胞测定。(2)过氧化物酶配制成不同浓度,在用干化学尿液分析仪进行实验,结果显示:过氧化酶浓度为2U/ml时干化学法即呈阳性结果(见表3)。因此,我们认为菌尿是引起干化学法测定尿红细胞假阳性的原因之一。

  表2 不同常见菌尿对尿红细胞测定结果的影响略

  表3 不同浓度过氧化物酶对尿红细胞测定结果的影响略

  尿沉渣分析仪DiaSys R/S500是目前用于测定尿液有形成分最先进的检测仪器,尿液中当细菌浓度超过一定时,本文结果显示在菌尿和非菌尿尿液中,尿红细胞DiaSys R/S500测定≥15/μl分别占总检测数的21.5%和6.5%。两者比较P<0.01,差异有非常显著性,这就说明细菌对尿沉渣分析仪测定红细胞也有一定的影响作用,Tsukahara也有相同的报道 [2] 。

  总之,菌尿不仅干扰干化学法测定尿红细胞,而且也影响尿沉渣分析仪对尿红细胞测定,因此,在试验中发现菌尿时,最好使用显微镜检查法或者其他方法来加以鉴别,以免 出现不必要的误诊 [3] 。

(实习编辑:陈战锋)