谷胱甘肽(glutathione,GSH)是生物体内最重要的非蛋白巯基化合物，直接或间接参与许多生物功能，保护细胞免受毒物的损害，并能提高机体解毒及增强氧化的能力[1]。另一方面它又可增强细胞内抗肿瘤药物的代谢与运输能力使细胞产生抗药性[2]。本研究采用生物化学DTNB法探讨急性白血病(acute leukemia,AL)患者血浆GSH含量的变化与临床疗效的关系。

　　1 资料与方法

　　1.1 一般资料 40例AL患者均为血液科住院者，男28例，女12例，年龄14~65岁，中位年龄30岁，均经临床及骨髓细胞形态与细胞化学染色确诊，诊断及疗效标准见参考文献[3]。将患者分四组：其中未化疗的初治未治组15例，采用联合化疗后缓解组13例，难治/复发组12例(诊断标准参见文献[4])，健康献血员(对照组)18例，男8例，女10例，年龄29~43岁，中位年龄33岁。

　　1.2 主要试剂与仪器 GSH试剂盒购自南京建成生物工程研究所。722型分光光度计为上海精密科学仪器厂产品。

　　1.3 测定方法 取患者全血肝素抗凝，取30 μl的血浆，按检测试剂盒说明进行测定。显色反应后在722分光光度计上调零，在波长412 nm，光径0.5 cm处比色测OD值。血浆中GSH(mg/L)=测定管OD值-测定空白管OD值/标准管OD值-空白管OD×标准管浓度(0.5 mmol/L)×GSH分子量(307)。

　　1.4 统计学方法 结果以样本均数±标准差(±s)表示，两组间比较用t 检验，使用统计软件SPSS 11.0对实验结果进行统计处理。

　　2 结果

　　2.1 AL患者GSH含量与病情变化 18例对照组血浆GSH含量(214.74±20.91)mg/L。40例AL患者中15例初治未治组血浆GSH含量(563.26±33.05)mg/L，较对照组明显升高(P<0.01);缓解组13例GSH含量(222.04±31.50)mg/L与对照组比较无差异(P>0.05)，难治/复发组12例含量(546.66±49.87)mg/L较缓解组明显增高(P<0.01)。见表1。表1 AL患者GSH含量与病情的变化注：初治组与对照组比较，P<0.01;缓解组与难治/复发组比较，P<0.01;缓解组与初治组比较，P<0.01;缓解组与对照组比较，P>0.05

　　2.2 AL患者化疗前后血浆GSH含量的变化 40例患者化疗前15例GSH含量(563.26±33.05)mg/L，明显高于化疗后组(377.30±167.37)mg/L(P<0.01)，见表2。 表2 AL患者化疗前后血浆GSH含量的变化注：两组比较，P<0.01

　　3 讨论

　　GSH是存在于生物细胞内最重要的非蛋白巯基化合物，有许多重要的生物功能，GSH的重要功能是通过酶促或非酶促反应，代谢机体产生的毒性物质起解毒作用。因此GSH可与抗肿瘤药物的自由基和过氧化物结合，从而降低抗肿瘤药物的细胞毒性，使肿瘤细胞产生抗药性。贺艳娟等[5]报道28例AL患者白血病细胞内GSH含量较正常对照组明显增高(P<0.01)，尤其化疗后临床疗效差者，GSH含量增高更加明显，病情缓解时GSH含量下降。Meijer等[6]研究表明，肿瘤细胞内GSH含量越高，细胞对化疗的敏感性越差，肿瘤细胞内GSH浓度与血浆内GSH浓度有较好的相关性。本文通过检测40例AL患者血浆GSH含量结果显示，化疗前组GSH含量较正常对照组明显增高(P<0.01)，尤其在化疗后缓解组GSH含量较难治/复发组含量明显降低(P<0.01)，与贺艳娟报道相似。

　　以上研究说明临床通过检测血浆GSH水平可用来替代肿瘤细胞内GSH水平测定，这对于判断肿瘤患者的病情变化与临床疗效有较重要的实际价值。林秀梅等[7]研究发现甲基莲心碱处理K562/A02耐药细胞株，可使GSH含量明显下降，与敏感的K562细胞株GSH含量无显著性差异(P>0.05)。综上所述，AL患者血浆GSH含量的变化，能反映临床病情及疗效关系。为临床治疗尤其是肿瘤耐药患者采用GSH耗竭剂提供实验依据。

　　【参考文献】

　　1 赵克然,杨毅军，曹道俊.氧自由基与临床.北京：中国医学科技出版社，2000，47-56.

　　2 Shen H,Kauvar L,Tewk D.Importance of Glutathione and associated enzymes in drug response.Oncol Res,1997,96(6-7):295-302.

　　3 张之南.血液病诊断及疗效标准，第2版.北京：科学出版社，1998，215.

　　4 姚尔固，徐世荣，董作仁.新编白血病化学.天津：天津科学出版社，2000，105.

　　5 贺艳娟，谢兆霞，陈浦荪，等.白血病患者多药耐药与白细胞谷胱甘肽含量的关系.湖南医科大学学报，1996，21(2)：134-136.

　　6 Meijer C,Mulder NH,Timmer-Bosscha H,et al.Relationship of cellular glutathione to the cytotixicity and resistance of seven platinum compounds.Cancer Res，1992,52:6885-6889.

　　7 林秀梅，谢兆霞，秦群，等.甲基莲心碱红霉素对K562/A02细胞谷胱甘肽含量的影响.中南大学学报(医学版)，2004，29(3)：284-286.

（实习编辑：陈战锋）