标本处理

　　1. 标本送验必须及时，收到标本后应立即检验。久置可致细胞破坏，影响细胞计数及分类检查;葡萄糖分解使含量降低;病原菌破坏或溶解。

　　2. 细胞计数管应避免标本凝固，遇高蛋白标本时，可用EDTA盐抗凝。

　　性状检查

　　主要观察颜色与透明度，可记录为水样透明、白雾状浑浊、微黄浑浊、绿黄浑浊、灰白浑浊等。脓性标本应立即直接涂片进行革兰氏染色检查细菌，并应及时接种培养基。

　　1.红色：标本为血性，为区别蛛网膜下腔或穿刺性损伤，应注意：将血性CSF试管离心沉淀(1500r/min)，如上层液体为黄色，隐血试验阳性，多为蛛网膜下腔出血，且出血的时间已超过4h。如上层液体澄清无色，红细胞均沉管底，多为穿刺损伤或因病变所致的新鲜出血。红细胞皱缩，不仅见于陈旧性出血，在穿刺外伤引起出血时也可见到。因CSF渗透压较血浆高所致。

　　2.黄色：除陈旧性出血外，在脑脊髓肿瘤所致CSF滞留时，也可呈黄色。黄疸患者的CSF也可呈黄色。黄疸患者的CSF也可呈黄色。但前者黄色透明的胶冻状。

　　3. 米汤样：由于白细胞增多，可见于各种脓性细菌引起的脑膜炎。

　　4. 绿色：可见于绿脓杆菌、肺炎链球菌、甲型链球菌引起的脑膜炎。

　　5. 褐或黑色：见于侵犯脑膜的中枢神经系统黑色素肉瘤。

　　潘氏球蛋白定性试验

　　原理

　　CSF中球蛋白与苯酚结合，可形成不溶性蛋白盐而下沉，产生白色浑浊或沉淀。

　　试剂

　　5%苯酚溶液：取纯苯酚25ml，加蒸馏水至500ml，用力振摇，置37℃温箱内1～2天，待完全溶解后，置棕色瓶内保存。

　　操作取试剂2～3ml，置于小试管内，用毛细滴管滴入CSF1～2滴，衬以黑色背景，立即观察结果。

　　结果判断

　　阴性：清晰透明，不显雾状。

　　极弱阳性(±)：微呈白雾状，在黑色背景下，才能看到。

　　弱阳性(+)：灰白色云雾状。

　　阳性(++)：白色浑浊。

　　强阳性(+++)：白色浓絮状沉淀。

　　最强阳性(++++)：白色凝块。

　　临床意义

　　正常时多阴性。有脑组织和脑膜疾患时常呈阳性反应，如化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎、梅毒性中枢神经系统疾病、脊髓灰白质炎、流行性脑炎等。脑出血时多呈强阳性反应，如外伤性血液混入CSF中，亦可呈阳性反应。

　　细胞计数

　　操作

　　细胞总数：

　　对澄清的CSF可混匀后用滴管直接滴入计数池，计数10个大方格内红、白细胞数，其总和即为每ul的细胞数。再换算成每升CSF中的细胞数。如细胞较多，可计数一大格内的细胞×10，即得每ulCSF中细胞总数。如用升表示，则再乘以106。

　　浑浊或带血的CSF可用血红蛋白吸管吸取混匀的CSF20ul，加入含红细胞稀释液0.38ml的小试管中，混匀后滴入计数池内，用低倍镜计数4个大方格中的细胞总数，乘以50，即为每ulCSF的细胞总数。

　　白细胞数：

　　非血性标本：小试管内放入冰乙酸1～2滴，转动试管，使内壁沾有冰乙酸后弃去，然后滴加混匀的CSF3～4滴，数分钟后，混匀充入计数池，按细胞总数操作中的红、白细胞计数法计数。

　　血性标本：将混匀的CSF用1%冰乙酸溶液稀释后进行计数。为剔除因出血而来的白细胞数，用下式进行校正。

　　参考值

　　正常人CSF中无红细胞，仅有少量白细胞。成人：(0～8)×106/L;儿童：(0～15)×106/L。

　　多为淋巴细胞

（实习编辑：陈战锋）